產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱:人肝永生化細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
生長特性:貼壁生長
特征特性: THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)細(xì)胞系是正常肝細(xì)胞用SV40大T抗原轉(zhuǎn)染得到。 將含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入兼嗜性包裝細(xì)胞株P(guān)A317中**病毒。 THLE-2 and THLE-3表達(dá)正常成人肝上皮細(xì)胞特征性的表型。 當(dāng)注射到無胸腺裸鼠中時(shí),它們不成瘤,具有接近二倍體的核型,不表達(dá)甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3將benzo[a]p
傳代方法:消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件:完全培養(yǎng)基+8%DMSO
產(chǎn)品名稱 | 人肝永生化細(xì)胞 |
英文簡稱 | THLE-3 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.人肝永生化細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。